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CS（EC 2.3.3.1）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞的線粒體基質中，是三羧酸循環第一個限速酶，是三羧酸循環主要調控位點之一。CS 催化乙酰CoA 和草酰乙酸產生檸檬酰輔酶A，進一步水解產生檸檬酸；該反應促使無色的DTNB 轉變成黃色的TNB，在 412nm 處有特征吸光值。""